时间:09-17人气:25作者:瑾残醉瞳风
叶绿素铜的含量测定采用分光光度法最为可靠。实验中将样品溶解在丙酮中,加入少量氢氧化钠溶液皂化反应。反应结束后用盐酸中和,再用氯仿萃取叶绿素铜。在645纳米波长下测定吸光度值,通过标准曲线计算含量。这种方法操作简单,结果准确,重现性好,实验室广泛采用。叶绿素铜标准品的制备需要精确称量,溶解后稀释成不同浓度系列,建立标准曲线时至少需要5个浓度点,确保线性关系良好。
高效液相色谱法(HPLC)是另一种精准测定叶绿素铜含量的方法。样品经过超声提取后,使用C18色谱柱分离,流动相为甲醇-水混合液,流速控制在1.0毫升每分钟。检测器设定在425纳米波长,根据保留时间和峰面积进行定量分析。HPLC法能同时检测多种色素,分离效果佳,灵敏度可达纳克级别。实际检测中,样品前处理需过滤膜去除杂质,进样量一般为20微升,系统适用性试验要求理论塔板数不低于5000。
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