pcr温度一般多少

PCR温度循环包括三个关键阶段：变性温度通常为94-98℃，使DNA双链分离；退火温度根据引物设计而定，一般在45-65℃之间；延伸温度多为72℃，适合Taq DNA聚合酶活性发挥。每个步骤的持续时间约20-30秒，整个循环过程重复25-35次，可扩增出数百万个目标DNA片段。

PCR仪器能精确控制温度变化，升温速率可达每秒3-5℃。热循环开始前，初始变性步骤需95℃处理2-5分钟，确保模板DNA完全变性。反应结束后，多数程序设置72℃继续延伸5-10分钟，完成所有未合成片段。冷却至4℃可保存产物，避免DNA降解。