wb电泳跑到什么位置停

时间:09-18人气:17作者:江晚正愁余

WB电泳停止位置取决于目标蛋白的分子量。小分子量蛋白(如10kDa)会跑到凝胶底部,大分子量蛋白(如150kDa)则停留在加样孔附近。中等分子量蛋白(如50kDa)通常位于凝胶中部。实际位置还需考虑凝胶浓度(8%-15%)和电泳时间(1-2小时)。蛋白标记物可作为参照,帮助判断目标蛋白的准确位置。

电泳缓冲液pH值(8.3)和电压(80-120V)影响蛋白迁移速度。高电压下蛋白跑得快但条带可能扩散,低电压则条带清晰但耗时较长。SDS-PAGE系统中,所有蛋白都带负电荷,向阳极移动。聚丙烯酰胺凝胶浓度越高,分离范围越小但分辨率越高。实验前应预跑胶确定最佳条件,确保目标蛋白位于理想位置便于后续转膜和检测。

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