双缩脲试剂的构成是什么

双缩脲试剂由氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液组成。氢氧化钠提供碱性环境，浓度约为0.1摩尔/升。硫酸铜提供铜离子，浓度约为0.01-0.05摩尔/升。使用时，两种溶液需要等体积混合。混合后，试剂呈蓝色，遇到蛋白质会呈现紫色反应。这种颜色变化源于蛋白质肽键与铜离子形成络合物。实验中，试剂需要现配现用，放置时间过长会影响检测效果。

双缩脲试剂的检测原理基于蛋白质结构特点。肽键(-CO-NH-)在碱性条件下与铜离子形成紫色络合物。反应灵敏度受蛋白质分子量影响，分子量超过6000道尔顿的蛋白质效果最佳。试剂对氨基酸和短肽无反应，特异性较高。实验室中，此试剂常用于蛋白质定量测定，检测范围约0.5-10毫克/毫升。反应温度控制在20-25摄氏度效果最佳，温度过高会导致背景颜色加深。